Inducción de la embriogénesis somática directa en phalaenopsis amabilis (L.) BI., a partir de segmentos foliares

Abstract

Whit the objective of development an appropriate methodology for induction of direct somatic embryogenesis in Phalaenopsis amabilis (L.) 81., from leaf segments were used immature leaf explants of 15 mm., obtained from flasks that were seeded dehiscent capsule. Leaf segments were evaluated for callus induction, using 12 treatments with different concentrations of auxin-cytokinin, naphthaleneacetic acid (0.00, 0.1 O and 1.00 mg/I) and thidiazurón (0.00, 0.1 O; 1.00 and 3.00 mg/I), accompanied by a basic culture medium consisting of mineral compounds (Murashige y Skoog, 1962) supplemented with 10.00 mg/I Myo-inositol, 0.50 mg/I Pyridoxine, 0.10 mg/I Thiamine, 2.0 mg/I Glycine, 170.00 mg/I NaH2P04, 2.0 g/I peptone, 20.00 g/I sucrose, 3.75 g/I Agar - Agar. Continuing with the process of induction of callus explants were incubated in darkness, grown in a culture medium for a period of 30-45 days in dark conditions and then subject to light, The percentage of callus induction in all treatments evaluated shows that at 30 days of induction there is a 100% reactivity callogénica, the appearance of globular pro-embryonic stages of Phalaenopsis amabilis (L.) BI., demonstrated in treatments T1, T2, Ts y Ts, and the confirmation the tirst embryonic stage (globular stage) show in treatments T5 y Ts, subsequently formed plants. Moreover include that during the development of direct somatic embryogenesis were identified embryonic creamy calli. key words: Pha/aenopsis amabi/is (L.) 81., naphthaleneacetic acid, thidiazuron, explant.

Con el propósito de desarrollar una metodología adecuada para la inducción de la embriogénesis somática directa en Phalaenopsis amabilis (L.) 81., a partir de segmentos foliares, se emplearon explantes de hojas inmaduras de 15 mm, obtenidas de frascos que fueron sembradas de cápsulas dehiscentes. Se evaluaron los segmentos foliares a la inducción de callos, utilizando 12 tratamientos con diferentes concentraciones de auxina-citoquinina, acido naftalenacético (0,00; O, 1 O y 1,00 mg/ i-) y thidiazurón (0.00; 0.1 O; 1.00 y 3.00 mg/i.), acompañado de un medio de cultivo base constituido por los compuestos minerales (Murashige y Skoog, 1962) suplementado con 10,00 mgli. Myoinositol, 0,50 mgli. Pyridoxine, O, 1 O mg/j_ Thiamine, 2,0 mgli. Glycine, 170,00 mg/j_ NaH2P04, 2,0 gli. Peptona, 20,00 gli. de suerosa, 3,75 g/j_ de Agar - Agar. Prosiguiendo con el proceso de inducción del callo los explantes fueron incubados en oscuridad, cultivados en un medio de cultivo por un lapso de 30-45 días en condiciones de oscuridad y luego sometidos a luz. El porcentaje de inducción de callos evaluado en todos los tratamientos del ensayo demuestra que a los 30 días de inducción existe un 100% de reactividad callogénica, la aparición de estadios globulares pro-embrionarios de Phalaenopsis amabilis (L.) 81., se manifestaron en los tratamientos T1, T2, T5 y Ta, y la conformación del primer estadio embrionario (estadio globular) se manifestó en el tratamiento Ts y Ta, posteriormente formaron plantas. Cabe mencionar que durante el desarrollo del proceso de embriogénesis somática directa se identificaron callos embrionarios de consistencia cremosa. Palabras Claves: Phalaenopsis amabi/is (L.) 81., acido naftalenacético, thidiazurón, explante.